Análisis cualitativo realizando una prueba de drogas

Para la mayoría de las sustancias prohibidas en el deporte profesional para el resultado de pruebas positivo es bastante simple recibir la confirmación de su presencia en una muestra de la orina. Como muchos métodos de proteger y obtener pruebas están basados en la aplicación de una chromatography en la combinación con la espectroscopia de masas, las recomendaciones para la identificación de compuestos químicos por medio de sistemas de GH-MS y ZhH-MS se han desarrollado (/MS). La presencia de la sustancia se considera confirmada si en la representación relativa de cierta cantidad de iones característicos (según la clase aplicada de la espectrometría de masas) la muestra es comparable, teniendo tolerancias en cuenta, con la muestra correspondiente del estándar sujetado al análisis similar. Además, el tiempo de la deducción de la sustancia no se debería diferenciar (dentro de un intervalo admisible de una desviación) en el análisis hromatografic de una muestra de orina del atleta y una muestra de control de la orina que contiene la sustancia requerida. Por lo tanto para la característica y la identificación de sustancias en muestras, tan difíciles para el análisis, como la orina prueba, la información del valor de definición sobre el hromatografic y, sobre todo, masa y parámetros del espectrómetro de los compuestos químicos estudiados tiene. Las numerosas investigaciones de la masa y las características del espectrómetro de la estimulación o enmascaramiento de medicinas hasta ahora se conducen, y también los métodos de su descubrimiento para la realización de una prueba de drogas se desarrollan (Masse et al., 1989; de Boer et al., 1991; Donike et al., 1995; Ayotte et al., 1996; Shackleton et al., 1997; Emparrados, 1998; Aguilera et al., 1999; Thevis et al., 2000, 2001, 2002, 2003a).

Adelante consideraremos los principios generales de realización del análisis de algunas de estas sustancias.

Esteroides anabólicos

Al considerar datos estadísticos acerca de resultados de las pruebas de dopaje llevadas y clases de las sustancias prohibidas reveladas, es posible notar que el más a menudo como la droga en esteroides del esteroide anabólico del deporte se aplican. Por ejemplo, más del 40% de las sustancias prohibidas encontradas por los laboratorios acreditados por el IOC en 2001 era esteroides anabólicos. Uno de representantes de este grupo es la testosterona derivada methyltestosterone, recibida por el reemplazo con el grupo metálico de un equilibrio restante de hidrógeno en S-17. Los esteroides anabólicos en la mayoría activamente se implican en procesos metabólicos, formando por lo tanto una serie de metabolites, por ejemplo la recuperación de ketogroups, oxidación de grupos hydroxyl, un hydroxylation, y también oxidación/recuperación de carbón de comunicaciones — carbón en un grano de la molécula del esteroide (Schanzer, 1996). Después de esta fase I del metabolismo y antes de la asignación ya que una parte de orina allí es una fase II del metabolismo, a saber la conjugación de productos de una fase I a glyukuropida o sulfatos.

La estrategia comúnmente aceptada de la identificación de metabolites de esteroides anabólicos está basada en la hidrólisis enzymatic de metabolites de una fase II durante la cual la fase I metabolites, su limpieza, concentración, derivatization y el análisis subsecuente del GH-MS se forman. La mayoría de metabolites de esteroides anabólicos, excepto nandrolon de la que será una pregunta abajo no es capaz para formarse en un cuerpo humano del modo natural por lo tanto en caso del descubrimiento de estas conexiones en la orina del atleta sujetado a una prueba de drogas que el mensaje en el resultado de pruebas positivo se hará.

Esteroides diseñados

El problema del uso de los llamados esteroides diseñados (esteroide del diseñador) en el deporte y en el mundo científico se acumula como un alud después en el octubre de 2003 (Caballero, 2003) el laboratorio de una prueba de drogas de Universidad de California en Los Ángeles encontró el derivado de la sustancia de gestrinon la preparación medicinal usado para el tratamiento de un endometriosis. El resto de Ethynesilt localizado en 17mo Carboneum de esta obligación lleva a la formación de la hormona del esteroide de tetragidrogestrinon (THG) que se puede considerar como un análogo de un esteroide anabólico muy eficaz de trenbolone, sin embargo los ensayos clínicos de la influencia fisiológica y los efectos secundarios de THG nunca se realizaron. La estrategia estándar de una prueba de drogas en laboratorios de investigación que todavía se mandaban en el descubrimiento de las medicinas farmacéuticas que pasaron pruebas clínicas parece ganar obviamente insuficientemente para vencer la aspiración de algunos atletas una victoria se cayó rivales fraudulentamente, poniendo al mismo tiempo en peligro la propia salud. Considerando el hecho que muchos procedimientos de la proyección están basados en la comparación de muestras estándares con ensayos de la orina con el uso de tales técnicas de una espectrometría de masas como la escucha de los iones del juego (escucha del ión seleccionada, SIM) o escucha de reacciones múltiples (escucha de reacción múltiple, MRM), los derivados desconocidos o las preparaciones medicinales, como el THG, son «invisibles * para procedimientos ordinarios del control. Causa la necesidad del desarrollo de técnicas más flexibles del control que permitiría descubrir tanto las sustancias conocidas, como desconocidas que poseen la estructura similar, por ejemplo el corazón del esteroide general que en principio es posible, en particular, con el uso de los sistemas modernos GH-MS/MS. Le también puede gustar Testalamin.

Esteroides endógenos

Si en caso de la aplicación de esteroides anabólicos en la orina hay metabolites que no se observan normales, el uso de la testosterona como la droga para encontrar mucho más difícil ya que esta hormona se produce en un cuerpo humano. Varios enfoques, el más extendido de los cuales son la determinación de una proporción testosterona / epitestosteron (T/E) y llamada masa y medida del espectrómetro de una proporción de isótopos estables de carbón (IRMS), se desarrollaron para este fin. El perfil de esteroides endógenos puede variar en varias situaciones (Geyer et al., 1996), sin embargo se mostró que la proporción Ò/Ý es un indicador confiable del uso de la testosterona como la droga como productos de un epitestosterop ocurre independientemente de la testosterona. Como el umbral el valor de proporción Ò/Ý los 6 iguales se aceptan, sin embargo en caso del exceso de un umbral el resultado de pruebas positivo se registra no directamente, el atleta debe pasar las nuevas investigaciones dirigidas al control del nivel de la testosterona levantado natural.

El aumento de la disponibilidad del análisis del isótopo por el método de la espectrometría de masas (IRMS) promovió la realización de varias investigaciones que mostraron una posibilidad de descubrimiento de distinciones entre la testosterona endógena y sintética por medio de este enfoque. En particular, se estableció que la testosterona natural se diferencia de los análogos sintetizados del modo químico que se usan como medicamentos basados en la proporción de isótopos de carbón, 3C/, 2C. La aplicación de GH con la combustión subsecuente de la sustancia analizada y el análisis del dióxido de carbono formado al mismo tiempo permite obtener la información sobre el origen de la testosterona basado en los isótopos esto sobre una proporción |3C y, JC (Homing et al., 1998; Aguilera et al., 1999).

Diuréticos y beta2-agonists

También los diuréticos y β2-àãîíèñòû pertenecen a sustancias que el análisis por lo general se hace por medio del GH-MS (/MS). En particular, el grupo de diuréticos es caracterizado por una variedad química de las medicinas designadas con los objetivos similares o idénticos. Aplique a representantes de este grupo de sustancias la ionización principalmente negativa (Thieme et al., 2001; Thevis et al., 2002, 2003a) que es causado por sus propiedades ácidas, sin embargo para algunos diuréticos, en triamteren particular, se requiere ionización positiva. Para β2-àãîíèñòîâ el enfoque principal es la sustancia analizada con el descubrimiento subsecuente de la molécula positivamente cargada. Como se describe en «Métodos de análisis», las fuentes de iones que integran GH al MS por lo general permiten generar el protonated o moléculas deprotoniron sin su fragmentación sensible. Así, la información estructural sobre las sustancias analizadas, precisión y selectividad de analizadores de masas se provee de la aplicación de la disolución (el DAO) de las medicinas ionizadas inducidas por colisiones y el análisis subsecuente de fragmentos derivados. Para este fin es necesario tener datos sobre la afinidad a protones y comportamiento de productos de la disolución después de la activación eficaz de las moléculas analizadas por medio del DAO que considerablemente discrepa en mecanismos de la fragmentación de moléculas del golpe electrónico (EI). Para diuréticos, y también para el bulto β2-àãîíèñòîâ, excepto salbutamol la realización del análisis de alta calidad es bastante. Por lo general los hromatogramma de los iones extraídos hacen el descubrimiento bastante sensible posible de estas sustancias en pruebas biológicas, y la conclusión positiva sobre su disponibilidad es sacada por una primogenitura la base del predominio numérico esencial de sus iones consiguientes. En 2001 aproximadamente el 17,5% de casos de resultados positivos realizados en 25 laboratorios de una prueba de drogas acreditada por el IOC perteneció a la aplicación β2-agonist, los diuréticos se encontraron en el 5% de casos.

Prueba de drogas: análisis cuantitativo

Para algunas sustancias, incluso stimulators, como el ephedrine, metabolites de esteroides anabólicos, tal, como nandrolon y β2-agonists, como el salbutamol, el nivel del umbral se establece, basado en la comparación con la cual la conclusión sobre resultados de pruebas positivos o negativos se saca. Varios motivos se hicieron la base para tal decisión. Ephedrines son una parte de muchas medicinas antifrías por lo tanto según reglas contra el dopaje su aplicación es legal si el contenido de derivados de norefedrin, ephedrine y pseudoephedrine en la orina no excede 5, 10 o 25 mg.-ml' 1 respectivamente. El grupo de convites de Salbutamol de simpatomimetik, es uno de 4 permitidos para el uso β2-àãîíèñòîâ (junto con salmeteroly, terbutaliny y formoteroly) en la condición de su aplicación en la forma de la inhalación. Para determinar cómo la medicina se aplicó (oralno en la forma de pastillas o en la forma de un aerosol) y en lo que la dosis, bastante difícil, durante los concursos relata sobre la presencia de salbutamol en pruebas en la federación relevante; si el contenido de la sustancia excede 100 ng-ml '1. Durante el período entre concursos el nivel del umbral de 1 mg.-ml «1 como usando algún simpatomimetik en las dosis que considerablemente exceden efectos anabólicos terapéuticos se observa se establece. La presencia de un metabolite de nandrolon 5a estrai Za ol 17 odin (norandrosterona) en la orina de atletas profesionales puede ser hasta cierto punto causada por productos endógenos por lo tanto para este contenido del umbral de la sustancia 2 ig-ml*1 para hombres y 5 ng-ml' 1 para mujeres se establece. Por razones de los valores recibidos las numerosas investigaciones se condujeron, varios factores que pueden influir en el nivel de la formación endógena de este metabolite, por ejemplo una tensión fisiológica considerable o embarazo que llevan al aumento esencial del contenido de esta sustancia en la orina también se consideraron. La determinación cuantitativa de estas conexiones se realiza con el uso de calibrar curvas que construyen basado en resultados de la determinación por métodos estándares de los estándares internos correspondientes que tienen propiedades físicas y químicas similares o idénticas (Schanzer, Donike, 1995).

Conclusión

Realizando una prueba de drogas el análisis de conexiones bajas y moleculares está basado principalmente en la aplicación de hromatografic y masa y métodos del espectrómetro que hacen el descubrimiento posible y la identificación de medicinas prohibidas y su metabolites en pruebas de líquidos biológicos, como sangre y orina. Mientras en antiguos años el análisis fue realizado principalmente por una chromatography de gas con el descubrimiento de los productos divididos varios analizadores, por ejemplo ardientes e ionización y detectores de fósforo del nitrógeno, y también masa y espectrómetro analizadores. Con los últimos trabajos generalmente la cromatografía líquida qué productos de la separación después de la ionización con una presión atmosférica se exponen espectrómetro de masas al análisis como este enfoque permite reducir considerablemente el tiempo de la preparación de muestras se aplica y no requiere un derivatization de las sustancias analizadas. Además, gracias a la aplicación triple de analizadores y realización de trampas iónica de la masa más flexible y experimentos del espectrómetro dirigidos a la determinación y la característica de las medicinas conocidas, y también las sustancias diseñadas desconocidas se hicieron posibles que también promueve el refuerzo de la lucha contra droga y uso ilegal de medicinas prohibidas. A partir del momento de creación de la lista de las sustancias prohibidas y los métodos del estímulo la variedad de sustancias a las cuales la atención realizando una prueba de drogas se presta deja de cambiar y los laboratorios dentro de este proceso dinámico deberían ampliar y modificar constantemente métodos de análisis, aumentando su sensibilidad, precisión y adaptabilidad a la solución de nuevas tareas de limitar abusos de medicinas en el deporte, y también salvar a atletas de sospechas falsas. Y aquí nuevo desarrollo en el campo de una chromatography rápida y muy eficaz, masa y espectrómetro, teniendo la alta resolución y la sensibilidad, y también las aceptaciones modernas de la ionización proporcionan a laboratorios analíticos instrumentos valiosos que permiten obtener hasta la información más detallada sobre las sustancias aplicadas, por ejemplo sobre su estructura y metabolismo y ampliar margenes de tiempo de la identificación de abusos de las medicinas estimulantes. Tantas medicinas, como esteroides anabólicos, se aplican durante el período entre concursos, pero al mismo tiempo guardan el efecto estimulante durante varias semanas, la prueba de drogas hecha y derecha requiere la realización de análisis tanto durante los concursos, como en el del período del concurso. Además, la precisión máxima y la sensibilidad de procedimientos analíticos se requiere.